【产品组成】

【产品简介】

本试剂盒提供一步法配制SDS-PAGE类梯度凝胶所需全部试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可便捷完成具有梯度分离效果的下层胶与上层胶的连续灌注，无需液封，操作高效。

特点：

无需优选浓度，单次灌胶即可有效分离10–250 kDa广泛分子量范围的蛋白；

采用A液、B液加等比例稀释液X的3试剂模式，简化类梯度凝胶配制流程；

预添加替代物，无挥发异味，操作更安全；

电泳后蛋白条带清晰、锐利，大小分子均获良好分离；

含快速电泳液干粉，全面提升实验效率。

【保存】

2~8°C保存，有效期12个月；SDS-PAGE快速电泳液干粉可常温保存，有效期36个月。

APS改良型促凝剂粉末需现用现配：每支加1 mL蒸馏水配成10%溶液，-20℃可保存2个月，4℃限2周内使用；

【使用方法】

1、选择浓度：本试剂盒配制的梯度凝胶可有效分离10-250 kDa分子量范围的蛋白，无需根据蛋白分子量预先选择凝胶浓度。传统凝胶浓度与分离范围对应关系可参考【参考附表1】。

2、配置工作液：

将所有试剂恢复至室温；

根据目标凝胶厚度及配制体积，按照【参考附表2】取所需体积下层胶A液和上层胶B液；

向A液和B液中分别加入等体积的稀释液X，混匀；

向上一步的两种混合液中分别加入10% APS改良型促凝剂溶液（加入比例为1:100），充分混匀。

3、灌胶：

先将混合好的下层胶工作液（A液+X液+APS）注入制胶玻璃板中；

紧随其后，缓慢加入上层胶工作液（B液+X液+APS），使其与下层胶自然形成梯度过渡界面，不需额外液封；

注：灌胶时需缓慢操作，防止两层凝胶混合。若操作不熟练，可在灌注完下层胶后，用乙醇或纯水进行液封，待下层胶凝固后再配置并灌注上层胶。

轻轻插入梳齿，避免气泡；待胶凝固后（约20 min），拔取梳齿即可用于电泳。

4、电泳：

配置电泳液：取一袋粉末，加入1L去离子水或者蒸馏水，充分溶解后即可。

推荐电泳条件：推荐150V-250V恒压电泳，25-45分钟即可完成电泳，适用于Mini-PROTEAN等常规模块胶系统。

注：回收的电泳液可重复使用1-2次。如观察到导电性下降或条带弥散，应更换新鲜电泳液。为取得最佳的电泳效果，请新鲜配置。

【注意事项】

本试剂盒适用于0.75/1.0/1.5 mm厚度凝胶，约可配制60–125块（0.75 mm）。

注：以上数据基于伯乐(Bio-Rad) Mini-PROTEAN 等标准制胶器计算，实际数量可能因具体操作、仪器型号及实验习惯略有浮动。

溶液中如有极少量漂浮物属正常现象，摇匀后可正常使用。

使用前所有试剂需恢复至室温。推荐在22–25°C环境下操作，凝胶通常在20分钟左右凝固。配合本公司快速电泳液（JF7414），从配胶到转膜完成仅需约1.5小时。

下层胶与上层胶工作液的体积比推荐为2:5，也可根据实际分离需求尝试3:4等其他比例。

部分品牌电泳仪使用过程中会产生热量，可适当调低电压进行电泳。

插入梳子时请缓慢操作，避免气泡影响上样孔成型。

本品仅供科研使用，严禁用于临床、食品、药品等领域。

为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服、手套等防护用具。避免与皮肤、眼睛接触，若误触需立即用水冲洗。

【参考附表 1】

传统凝胶浓度与分离范围对应关系图

【参考附表 2】

0.75 mm厚度凝胶配置（毫升）

1.0 mm厚度凝胶配置（毫升）

1.50 mm厚度凝胶配置（毫升）