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非变性组织/细胞裂解液

Nondenature Lysis Buffer

品牌:JSENB
牌号:JF5292
质量标准:生物技术
JSENB

CAS号 Solution分子量 暂未收录分子式 暂未收录MDL号 暂未收录NACRES编号 暂未收录Beilstein/REAXYS编号 暂未收录
牌号和规格网点货期/库存包装规格牌价(CNY)折扣价(CNY)
JF5292-100ml涿州仓3天100ml¥ 295.00¥ 295.00
JF5292-3x100ml涿州仓3天3x100ml¥ 797.00¥ 797.00
JF5292-6x100ml涿州仓3天6x100ml¥ 1431.00¥ 1431.00
产品简介:
非变性组织/细胞裂解在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原-抗体结合或酶学活性,适宜于进行免疫共沉淀。有些抗体只能识别非变性蛋白的抗原位点或对非变性蛋白具有更高的结合能力,建议使用非变性裂解液。
使用方法:
根据使用量,按照lml裂解液加入10ul PMSF,使PMSF的终浓度为1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1.样品前处理: .
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、 生理盐水或无血清培养液洗- -遍。按照6孔板每孔加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触,冰上放置裂解5-10分钟。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250 微升裂解液的比例加入裂解液,冰上放置裂解5-10 分钟。期间可以用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20毫克组织加入150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2.后处理:充分裂解后,将裂解后的样品10000-14000g 离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、 WB和免疫沉淀、免疫共沉淀等操作。
储存条件:-20℃保存
注意事项:
1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。购买后可以适当分装后使用;
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4°C进行;
3.为了您的安全和健康,请穿戴实验服和一次性手套。